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                  構樹的組織培養和快速繁殖研究

                  作者: 組培設備 發布時間: 瀏覽次數0

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                    構樹是??贫嗄晟~樹種,又名谷漿樹等。構樹適應性廣,生長速度快,耐瘠薄,耐鹽堿,維護成本低。它具有很高的觀賞價值,可以單獨種植,成排(行道樹)或成組種植。它是優良的造林樹種。利用現代生物技術,對構樹進行組織培養和快速繁殖。對構樹莖段進行離體培養和繁殖,篩選出構樹莖段不定芽誘導、不定芽增殖和壯苗生根的培養基,為實現快速無性繁殖、擴大種源生產和保存優良品種提供了有效的方法。

                  組織培養

                    1材料和方法

                    1.1測試材料

                    在優良的母樹上選擇完整和健壯的枝條作為試驗材料。

                    1.2試驗方法

                    1.2.1外植體的消毒。用蘸有洗衣粉的細刷子刷收集的樹枝,并用自來水沖洗30分鐘以上。用75%酒精在潔凈的工作臺上浸泡15-30秒,用無菌水沖洗一次,用0.15%氯化汞溶液消毒6-8分鐘,用無菌水沖洗3-4次;濾紙吸干后,將1-1.5厘米帶芽莖段切下,接種在芽誘導培養基上。

                    1.2.2芽誘導培養。以MS為基本培養基,添加不同濃度的6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0毫克/升)、NAA(0.1、0.2、0.5、1.0毫克/升),通過正交試驗設計16個處理。每種處理重復3次,重復9種植物。30天后,調查芽分化率(外植體數量/分化不定芽的外植體總數)、分化系數(不定芽總數/從外植體分化的外植體總數)和不定芽生長狀況。

                    1.2.3芽增殖培養。以質譜為基礎培養基,加入不同濃度的6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0毫克/升)和NAA(0.1、0.2、0.5毫克/升)。通過正交試驗設計了12個處理。每次處理重復3次,每次9株。30天后,研究芽的增殖因子和不定芽的生長狀態。

                    1.2.4壯苗的生根培養。以1/2MS為基本培養基,添加不同濃度的NAA(0.1、0.2、0.5、1.0毫克/升),共進行4個處理,每個處理重復3次,每次9株。40天后,觀察生根率(生根苗數/生根苗總數)、平均生根數(總生根數/生根苗數)、根狀態和不定芽生長狀態。

                    1.2.5培養條件。在MS培養基中加入2%蔗糖和0.6%瓊脂,5.8 ~ 6.0,培養溫度252,光照強度2000 ~ 3000勒克斯,光照時間12小時/天

                  組織培養

                    2結果和分析

                    2.1芽誘導培養

                    接種后2周莖段底部形成莖段愈傷組織,3周后觀察到不定芽形成。當MS6-BA1毫克/升NAA 0.1毫克/升時,不定芽誘導率高,芽生長勢好,切口愈傷組織適宜。然而,添加其他激素的誘導率較低或較高,但不定芽生長較弱。認為MS6-BA1毫克/升NAA 0.1毫克/升是誘導不定芽的培養基。

                    2.2 芽增殖培養

                    芽誘導培養后形成的生長健壯的含有多個芽的芽叢切割成單芽,并將芽叢中2cm 以上的單芽切割成含有一個腋芽的莖段接種在芽增殖培養基上,不定芽接種后2 周左右可觀察芽的增殖情況。6-BA 濃度越高,芽的增殖倍數越大,但新芽生長細弱葉色淡綠,綜合考慮認為MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA0.1 mg/L 為不定芽增殖的培養基。

                    2.3 壯苗生根培養

                    當不定芽長到2~3cm 高時轉移到壯苗生根培養基上。2 周后有不定根產生,40 天時觀察認為4 種不同濃度的生根培養基對誘導均有明顯的效果,其中1/2MS+NAA 0.1mg/L 培養基生根率較高,不定芽生長較好

                    2.4組培苗的移植

                    當瓶苗長到4-6片葉和3-5厘米株高時,即可煉苗移栽。取出瓶苗,用清水清洗根培養基,種植在珍珠巖、蛭石和泥炭土混合的111基質中,用塑料薄膜覆蓋,增加空氣濕度,提高成活率,幼苗成活后每2周用稀釋的培養基母液對葉表面進行施肥,使幼苗健康生長。

                  組織培養

                    3展望

                    以構樹的帶芽莖段為外植體進行不定芽的組織培養,通過調節培養基中的激素配比,大大加快了不定芽的分化速度,繁殖系數達到5-10倍,可以在短時間內提供大量的種苗,解決了根蘗,構樹常規播種繁殖速度慢的現狀改變了扦插等方法,不僅解決了構樹苗木需求量大的問題,為造紙、飼料等相關行業提供了充足的苗木來源,也為轉基因品種的保存、遺傳轉化和培育篩選奠定了堅實的理論基礎。

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